DC体内疫苗策略

将抗原直接靶向体内DCs以诱导肿瘤特异性免疫反应，这样既可以避免难以标准化的问题，亦可扩大离体DCs的生产，减少费用和工作量。靶向体内DCs的疫苗不仅可以大规模生产，还可以使体内多个部位的天然DCs亚群激活。早期的DC体内疫苗是将过表达GM-CSF的肿瘤细胞经辐照后回输到体内以激活APCs的募集和呈递功能。GVAX是表达GM-CSF的胰腺癌细胞疫苗，将GVAX同种异体回输至患者体内，可以诱导T细胞迁移至胰腺癌的微环境中。在有关GVAX的一项Ⅱ期临床试验中，无论是否联合使用低剂量环磷酰胺和重组减毒活单核细胞性李斯特菌（经基因工程改造可分泌间皮素）(CRS-207)，诱导的CD8+T细胞免疫应答的强度与晚期胰腺癌患者总生存期呈正相关。但是，一项Ⅱb期临床试验研究显示与化疗相比，使用CRS-207联合GVAX及化疗未改善胰腺癌患者的总生存期(NCT02004262)。一项以激素治疗难治性前列腺癌患者的Ⅲ期临床试验证实，肿瘤微环境中GM-CSF存在时间与疾病的进展有关；这可能是由于募集了髓样抑制细胞或使髓样前体分化为未成熟的免疫耐受的DCs所造成的。

CD40L和CLRs可介导DC体内疫苗的产生。目前，已使用CD40激动剂来激活DCs，从而促进促炎性细胞因子的释放和T细胞的激活。在小鼠肿瘤模型中，小鼠经过化疗后给予CD40激动剂，结果显示CD40激动剂可诱导CD8+T细胞免疫应答并促进肿瘤的清除。一项CD40激动剂(CP-870,893)联合吉西他滨(gemcitabine)治疗晚期胰腺导管腺癌的Ⅰ期临床试验表明，CD40激动剂可以诱导有效的免疫应答。另外，CD40激动剂还可以通过激活单核细胞来调节肿瘤微环境。小鼠试验显示，CD40激动剂可以激活DCs、诱导M2型巨噬细胞向M1型转变，并抵抗免疫检查点对T细胞的抑制作用。

由于DCs表面表达多种CLRs，因此用来识别和摄取糖类抗原的CLRs也可作为体内激活DCs的主要靶点。通常将靶向CLRs的抗体与肿瘤特异抗原或HIV特异抗原偶联，制备成靶向抗原。在小鼠实验中，靶向CLRs（DEC205、Langerin和Clec9A）的抗原可有效诱导T细胞的免疫应答。其中，在人源化小鼠模型中，Clec9a靶向抗原可成功诱导细胞和体液免疫反应，显示出其临床应用的潜力。最近研究中，使用DEC205靶向抗原已成功诱导抗癌症抗原和HIV抗原的免疫应答。已在人体中证实，DC-SIGN、MR及DEC205的靶向抗原可激活特异的T细胞应答，尽管一些免疫应答比较微弱。

目前，靶向抗原与临床反应的相关性尚不清楚，需要进一步扩大性临床试验以评估疗效。DEC205-NYESO-1靶向抗原用于治疗多种实体肿瘤（NCT02166905、NCT01522820和NCT02129075）的临床试验正在进行，针对AML(NCT01834248)的临床试验已经完成，相关结果尚未公布。另一个靶向抗原策略是利用趋化因子靶向表达于CD141+DCs表面的趋化因子受体XCR1。此外，可全身性使用脂质体复合物包被的肿瘤抗原RNA(RNA-lipoplexes,RNA-LPX)将抗原递送给DCs。脂质体复合物可保护RNA免受降解，而RNA可激活pDC并释放I型IFNs。一项包被编码4种TAAs的mRNA的脂质体复合物用于治疗黑色素瘤的Ⅰ期临床试验正在进行(NCT02410733)。

鉴于DC疫苗的安全性，目前正在对其进行免疫预防测试，旨在防止癌症复发。目前正在患有Lynch综合征的患者或具有微卫星不稳定性的结直肠癌患者中进行评估。这些患者的DNA修复基因通常存在种系突变。在其中一项正在进行的临床试验(NCT01885702)中，已在这些患者中鉴定出各种基因的突变，例如编码caspase、TGFβ受体和CEA的基因。而且，已在这些患者中发现具有识别这些突变抗原的T细胞；因此，对高危人群来说，自发免疫可能是一种合理的免疫疗法。因此，研发DC疫苗的长期目标是预防性免疫高复发风险的患者。